在血浆中,人血清白蛋白是一种含量极为丰富的载体蛋白,可以跟人体内药物分子融合,从而运输至人体各个部位,进一步发挥出有效作用。药物小分子与人血清白蛋白相结合,能够对药物的吸收、分析及新陈代谢产生重要影响,与此同时还能够对药物的稳定性及毒性产生很大程度的影响。本组采取多种方法对药物小分子与血清白蛋白之间的相互作用进行了分析,具体内容如下。
1 药物小分子与人血清白蛋白的相互作用
对于生命新陈代谢的维持,人血清白蛋白发挥了非常重要的作用。同时,人血清白蛋白也是疾病诊疗观察过程的一项重要的参考指标。近年来,在医药快速发展的背景下,药物的大量应用致使分子在体内和人血清白蛋白发生了诸多反应,进一步导致人血清白蛋白的构象发生变化。
药物在进入人体之后,先和人血清白蛋白相结合,大量学者对药物小分子和人血清白蛋白的作用机理进行了探究,比如姜黄素、白藜芦醇脂肪酸及布洛芬等。其中,白藜芦醇脂肪酸可以跟人血清白蛋白进行有效结合,从而使其荧光强度增强,并使其紫外吸收减弱。
2 探究方法分析
对于药物小分子与人血清白蛋白相互作用的研究,会应用到多
种方面,具体表现如下:
2.1 光谱分析法
在对生物大分子,尤其是蛋白质和药物之间的作用进行分析过程中,通过使用到光谱分析法。对于药物小分子,通过静电、疏水及氢键等方式和人血清白蛋白之间产生作用。产生作用之下,使蛋白质的光谱性质发生显著变化,并结合光谱技术定性及定量检测其作用的改变,从而更深层次地对其作用进行研究。
对荧光探针与蛋白质结合之后峰的强度、波长及位移进行测定,能够对其微环境的极性及蛋白质构象等性质进行研究。使用荧光分析,具备多方面的优势,比如选择性优良、重现性良好及灵敏度高等。有学者使用荧光法对马兜铃酸I和人血清白蛋白进行结合,结果发现马兜铃酸I结合到Trp-214,从而使人血清白蛋白的荧光强度得到有效降低。
2.2 毛细管电泳法
对于毛细管电泳法来说,是具备多方面的优势的,包括了:(1)药物与白蛋白混合液不需要进行处理;(2)一次进样能够将药物总浓度与有利药物浓度同时测量出来;(3)对于纳摩尔进样量或者更低的进样量,依旧具备优良的重现性。等使用亲和毛细管电泳技术,对犀草素、槲皮素和山柰酚三类黄酮类化合物与人血清白蛋白结合,从而得出三者的常数分为9.42105mol/L、1.23106mol/L、3.78105mol/L。
2.3 圆二色谱法
在圆二色谱当中,人血清白蛋白具备2个负峰,分别处在208nm处与222nm处,属于人血清白蛋白当中-螺旋结构的性质。通过对其波长的改变,能够将-螺旋含量的变化研究出来。Ding等人利用此方法对人血清白蛋白与C.I.AcidRed2之间的相互作用进行了研究,结果表明:C.I.AcidRed2能够在疏水作用与氢键作用相结合的情况下,到达人血清白蛋白的I点位置,并且还能够使人血清白蛋白的构象产生改变。Pan等经圆二色谱法试验表明:增加酒石黄的量能够使-螺旋的含量降低。所以,在人血清白蛋白结构产生解折叠的情况下,便会加大疏水带的暴露。
2.4 分子对接技术
利用分子对接技术,可以获得人血清白蛋白晶体的三维构象。Yue等对人血清白蛋白与配体产生结合情况下的晶体结构进行了研究,表明人血清白蛋白的色氨酸残基Trp-214与小分子相接近,并且具备疏水作用及范德华力。并且,还表明配体能够将人血清白蛋白的荧光猝灭。基于配体当中的A环和Lys195、C环和Arg222之间具备氢键作用。Jiang等在利用计算机技术及分子对接技术的基础上,对人血清白蛋白和水甘草碱之间的相互作用进行了分析。从而得出水甘草碱与人血清白蛋白的复合物的最低能量排列。从晶体结构中,也能够得出两大作用力,其一为氢键作用,其二为疏水作用。其吉普斯自由能趋近与理论值。
3 结论
对于小分子猝灭人血清白蛋白荧光机理的研究,使用最为广泛
的方法有两种,其一为荧光光谱法、其二为紫外光谱法。对于人血清白蛋白构象改变的研究,则需要录用分子对接技术、圆二色谱法及红外光谱技术等。人血清白蛋白和药物分子相融合与诸多领域有所关联,包括了农药领域、病理学领域及食物领域等。由于两者之间的作用机理到目前为止还不具完善性。所以,进一步对药物小分子和人血清白蛋白之间的作用进行分析便显得极为重要。显然,在研究过程中需要依靠更加有效的手段及技术。相信该研究的完善能够为各个领域的发展起到促进作用,进一步为人们的健康提供重要保障。
