激素类药物在临床上广泛使用,但过量使用容易发生全身性的过敏反应,包括面部、鼻黏膜、眼睑肿胀等,长期用药还会体重增加、下肢浮肿、骨质疏松、肌肉萎缩等。但近年来,许多中药制剂、化妆品或者其他的药品或者中非法添加化学成分的现象时有发生,给人民的身体健康造成了严重危害。因此制定快速、简便分离鉴别各种物质中非法添加激类成分的方法,一方面可以完善现有的检测标准,另一方面可以简化检测方法,供药监、药检部门开展工作时参考。本文建立了快速分离鉴别多种混合激素( 地塞米松、醋酸地塞米松、醋酸可的松、醋酸氢化可的松、氢化可的松、醋酸泼尼松龙、曲安西龙)的薄层色谱的方法。
1 仪器与试药
曲安西龙对照品,批号100333-200201; 氢化可的松对照品,批号100152-200206; 地塞米松,批号100129-200804; 醋酸泼尼松龙对照品,批号100124-200303; 醋酸氢化可的松对照品,批号100013-200107; 醋酸泼尼松对照品,批号100012-200706; 醋酸可的松对照品,批号100123-200303; 醋酸地塞米松对照品,批号100122-200805( 均购于中国药品生物制品检定所) ; 所用试剂均为分析纯; 水为超纯水。
2 实验方法
2. 1 色谱条件
GF254 薄层板; 展开剂二氯甲烷∶ 丙酮∶ 甲醇( 12∶2∶0. 5) 。
2. 2 对照
品溶液的制备取地塞米松、醋酸地塞米松、醋酸可的松、醋酸氢化可的松、氢化可的松、醋酸泼尼松龙、曲安西龙对照品,加甲醇制成每1mL 各含1mg 的溶液,作为对照品溶液。
2. 3 供试品
溶液的制备取上述对照溶液各1mL,置于20mL 容量瓶中,加甲醇定容,作为供试品溶液。
2. 4 测定
分别吸取上述供试品溶液15L、对照品溶液5L,分别点于同一硅胶硅胶GF254 薄层板上,以二氯甲烷∶丙酮∶ 甲醇( 12∶2∶0. 5) 为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯图1 薄层色谱分离图注: 1 地塞米松,2 醋酸地塞米松,3醋酸可的松,4醋酸氢化可的松,5七种混合激素供试品溶液,6氢化可的松,7 醋酸泼尼松,8醋酸泼尼松龙,9曲安西龙( 254nm) 下检视。结果。
3 结果与讨论
3. 1 在紫外光灯( 254nm) 下检视。供试品溶液在相应的位置上出现与对照品相同颜色的斑点,可初步判断供试品溶液中各斑点的糖皮质激素种类。
3. 2 试验中曾经多次对不同的展开剂比例进行比较,在同样的实验条件下,采用展开剂二氯甲烷∶ 丙酮∶ 甲醇( 12∶ 2∶0. 5) ,各对照品均显明显的斑点,且混合激素分离良好。而其他的比例,个别斑点不清晰,混合激素成分也不能完全的分离,故选二氯甲烷∶ 丙酮∶ 甲醇( 12∶ 2∶ 0. 5) 。此外本文使用的展开剂均为安全,低毒的有机溶液,适合于日常的检验。
3. 3 本法通过不同薄层板,不同温度以及不同湿度等耐用性考察,条件稳定可靠,可作为一种快速筛查方法,用于抗风湿中成药中非法添加糖皮质激素类的检验。