珊瑚姜是贵州省一种地道的苗药, 其块茎提取出的挥发性油主要成分是对孟烯-4- 醇( 松油醇), 含量30%。近年,珊瑚姜油常在医学美容和芳香疗法方面作为精油的应用等同于茶树油, 在美容方面和对女性卵巢有很好的保养作用,但能否促透皮吸收尚有争议。所以本研究除了研究珊瑚姜油能否透过皮肤吸收到血液中外, 还监测了家兔卵巢中的含量。
1 材料与方法
1. 1 实验药品与器材 珊瑚姜油( 由贵阳舒美达制药有限公司提供)、75% 酒精、脱毛剂( 硫化钠8 g 溶于100 ml 水)、10% 水合氯醛、家兔( 由贵阳医学院动物实验中心提供)、日本ZHIMADZU( 岛津) 生产的GC-14C 气相色谱仪, 配有氢火焰离子化检测器( 由贵州师范大学分析中心提供)。
1. 2 方法
1. 2. 1 药物的配制 珊瑚姜油低浓度组(20%) 由珊瑚姜油40 ml 加到75% 酒精160 ml 中制成。珊瑚姜油中浓度组(50%)由珊瑚姜油100 ml 加到75% 酒精100 ml 中制成。珊瑚姜油高浓度组(100%) 为珊瑚姜油200 ml。
1. 2. 2 实验方法 取平均体重(2.00.1)kg 雌性家兔15 只,随机分成三组。第一组:为低浓度组;第二组:为中浓度组;第三组:为高浓度组。在家兔的背部剪去10 cm10 cm 范围的被毛, 再用脱毛剂脱毛成光滑的皮肤, 待用。第一组以低浓度的珊瑚姜油2 ml 涂抹家兔的皮肤, 2 次/d, 连续用药5 d ;第二组以中浓度的珊瑚姜油2 ml 涂抹家兔的皮肤, 2 次/d, 连续用药5 d ;第三组以高浓度的珊瑚姜油2 ml 涂抹家兔的皮肤, 2 次/d, 连续用药5 d。每只家兔给完最后一次药, 4 h 后用10% 水合氯醛3 ml/kg 腹腔注射麻醉后取心脏血5 ml, 分离出血清待测;取卵巢0.3 g 用滤纸蘸去血液后加3 ml 生理盐水研磨成匀浆, 然后以2500 r/min 离心5 min, 取上清夜待测。
1. 2. 3 检测方法 取2 ml 的样品在带塞的离心玻璃管中, 加入1 ml 的苯盖紧塞子, 用力震荡5 min, 然后以3000 r/min 离心10 min, 取上层有机相为供试样品。采用日本ZHIMADZU( 岛津) 生产的GC-14C 气相色谱仪进行测定, 色谱条件为SE-30 石英毛细管柱(30 M0.53 mm0.25 柱温是在50℃保持4 h 后, 以10℃ /min 升至200℃ , 保持5 min ;检测器和进样器温度均为230℃ ;氮气作为载气, 分流比10 ∶ 1。
N2 640 kPa, O2 60 kPa, H2 40 kPa。先检测出标准品中珊瑚姜油主要成分对孟烯-4- 醇( 松油醇) 峰值出现的时间及其峰面积, 待测样品在这个时间出现的峰值, 就是待测样品中对孟烯-4- 醇( 松油醇) 的峰值, 按归一法计算样品中对孟烯-4- 醇( 松油醇) 的含量。( 由贵州师范大学分析中心测算)
1. 3 统计学方法 采用SPSS11.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数 标准差( x-s) 表示, 采用t 检验。按组间单因素方差分析。P0.05 表示差异具有统计学意义。
2 结果
三组家兔血清及卵巢中松油醇含量比较, 珊瑚姜油高浓度组血液和卵巢中对孟烯-4- 醇( 松油醇) 的含量高于低浓度组和中浓度组, 差异有统计学意义(P0.001)。
3 讨论
正常的皮肤不但有防护功能, 而且有吸收的作用。但是药物能否透过皮肤吸收及其途径至今仍有争论, 一般认为皮肤角质层是药物透皮吸收的主要屏障。现在大多数学者认为皮肤的吸收作用主要通过以下3 条途径:①透过角质层细胞, 是主要的吸收途径;②角质层细胞间隙和毛囊, 此通道是电解质的唯一通道;③皮脂腺或汗管, 有少数重金属及化学物质是通过毛囊和汗腺管弥散到真皮中去的, 它的重要性不如角质层。
珊瑚姜(Zingiber Corallinum Hance), 又名阴姜, 是贵州道地中草药, 对多种致病性皮肤真菌具有抑制和杀灭作用, 效果极佳, 同时有止咳平喘之功效。袁果等超临界CO2 萃取珊瑚姜根茎精油, 经气相色谱及色谱/ 质谱仪联用仪分析,共检出53 个组分, 鉴定出已知化合物32 个, 占精油成分全量的84.48%, 主要成分为对孟烯-4- 醇(30%)、1, 8- 桉叶油素 (10%)、- 甜没药烯、反式-3, 4- 二甲氧基肉桂醛、3,5- 二甲氧基肉桂炔醛、3- 甲氧基-4- 羟基肉桂酸甲酯等萜烯、萜醇、芳醛、芳酸酯类化合物。在珊瑚姜根茎精油众多的化学成分中, 具有消炎、抗菌作用的成分主要是孟烯-4-醇、桉叶素油。它的主要成分与茶树油的主要成分非常相近,有许多学者在广谱的抗微生物活性及医学美容中作为精油应用方面作了研究。
目前国内和国外还没有学者对珊瑚姜油的透皮吸收性作过研究, 对于珊瑚姜油能否透过皮肤吸收到体内, 有些学者持怀疑态度。本实验证实了珊瑚姜油可以通过皮肤吸收到血液和体内器官, 特别对珊瑚姜油能否通过皮肤外用吸收到卵巢做出了明确的回答。实验同时证明珊瑚姜油吸收到体内的量是随着其浓度的升高, 其吸收的量也随之增多。由于精油一般不用纯精油, 故在使用时应与基础油混合使用, 这样必然就会降低精油的浓度, 减少对精油的吸收, 可在精油内加其他的促透皮吸收剂, 促进精油的吸收。
实验表明, 对孟烯-4- 醇( 松油醇) 在雌性家兔卵巢中的浓度较其他器官和血液中的浓度高, 这可能与用药的部位有关。表明对孟烯-4- 醇( 松油醇) 可能有一定的卵巢辐集性。这种辐集性对卵巢的保养有其积极的意义, 同时也提醒广大医务人员注意这种辐集性对卵巢的毒副作用和不良影响, 也有必要监测对孟烯-4- 醇( 松油醇) 对肝肾功能的影响, 这也是医务人员下一步要进行的研究方向。