结核菌耐药性发生率的增加, 是导致结核病化疗失败的主要因素, 增加了临床治疗肺结核的难度, 故肺结核菌型鉴定与耐药性的检测, 对肺结核病控制工作起主要作用。现将本所2012 年6 月~2014 年6 月门诊肺结核患者256 例结核分支杆菌耐药情况分析如下。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 结核菌株来自于本所2012 年6 月~2014 年6 月门诊肺结核患者痰菌培养阳性256 例, 其中男165 例, 女91 例, 按照《结核病诊断实验室检验规程》进行各项系统检验。
1. 2 试剂与方法
1. 2. 1 试剂 改良罗氏培养基(L~J 培养基) 由本单位配制,SM、INH、RFP、EMB 4 种药敏培养基及对硝基苯甲酸(PNB)和噻吩-2- 羧酸酰肼(TCH) 鉴别培养基由贝索公司提供。
1. 2. 2 方法 采集患者清晨未服用抗结核药物, 漱口后深部咳嗽出的痰为标本, 痰液用4% 氢氧化钠处理20 min, 接种于改良罗氏培养基, 培养出256 例阳性菌株。
1. 3 药敏试验及菌型鉴定 依据《结核病诊断实验室检验规程》, 采用比例间接法作药物敏感试验, 用分离出的分枝杆菌菌株分别制成10-2 mg/ml 和10-4 mg/ml 的混悬液, 用22SWG 标准接种环移取0.01 ml 分别接种在空白对照和各含有链霉素(S)、乙胺丁醇(E)、异烟肼(H)、利福平(R)4 种药物的改良罗氏培养基中, 检测它们的耐药性, 若含药培养基菌落数/ 对照管培养基菌落数1% 则认为受试菌对该抗结核药耐药。用10-3 mg/ml 菌液接种于PNB 和TCH 鉴别培养基进行分型。
2 结果
256 例阳性耐药菌株中, 人型分枝杆菌247 株(96.48%),牛型分枝杆菌7 株(2.73%), 非典型分枝杆菌2 株(0.78%)。其耐药率检测的结果为：耐单药59 例(23.05%) , 耐二药30 例(11.72%), 耐三药12 例(4.69%), 耐四药4 例(1.56%)。
3 讨论
肺结核病是一种呼吸道传染病。我国成人患活动性肺结核的人数占全世界的人数将近50%, 肺结核死亡率很高, 目前肺结核感染预防和控制面临两大难点：①抗结核药物的高度耐药, 控制结核菌感染难度增加, 传染源不能有效控制, 病情进一步加重, 严重时危及生命。②一些结核杆菌没有特异性,致病菌种繁多, 不易检测, 且耐药情况与菌型鉴定需要的时间比较长, 患者的早期用药不明确, 处于盲目用药状态。
从本组病例中根据菌型和耐药药敏的测定情况来看, 牛型分枝杆菌感染发病率呈上升趋势, 且单药耐药率高, 耐单药以耐SM、INH、RFP 为主, 而INH 为抗结核方案中主要化疗药, 也是高耐药之一, 它的高耐药会给导致整个化疗失败, 而耐两种、三种、四种药物的耐药率呈下降趋势, 抗结核药物产生耐药性, 原因有用药种类单一, 没有监测药物疗效并随时更换, 不重视联合用药, 导致耐药性的发生;用药没有规律, 且方法及时间没有按标准, 漏服或未长期坚持,继发性耐药与用药时间不正确有因果关系。肺结核治疗失败的主要原因可能与用药疗程不足、药物治疗不规律及未全程用药、耐药变异菌株的产生有直接的关系。抗肺结核病的治疗, 要严格遵循早期、规律、全程、联合的原则, 加强对肺结核患者特别是初治患者进行宣传教育工作, 取得患者合作,才能使抗结核治疗成功率提高。
总之, 加强结核患者归口管理, 抓好初治病例治疗和管理, 实施抗结核药物统一管理和推行全程督导化治疗, 结合结核菌型鉴定和药敏的检测结果, 随时改变化疗方案, 增加药物疗效, 进一步降低耐药率, 对更好地控制结核病的传播及病情有重要价值。
