紫萁(0smunda. lapomc Thunb)或其近缘种分株紫萁(Osmunda. Cmllamolnea)的卷曲未展的嫩叶加工而成的山野菜称薇菜。其营养丰富、风味独特、安全卫生,被誉为“山菜之王”,深受消费者的喜爱,目前尚处于野生状态。为了更好地保护、利用和开发薇菜资源,人工栽培薇菜已引起广泛的关注,自2000年来,我们借鉴国内外观赏蕨类组织培养及栽培经验,对薇菜试管苗的培育进行了探索,积累了利用孢子繁育试管苗的技术经验。
1、薇菜试管苗的诱导与增殖
将薇菜成熟的孢子接种到人工培养基中,产生丝状体、片状体、原叶体,进一步培养发育为幼孢子体试管苗。
1.1成熟孢子叶的采集
每年4月间,在海拔700~1200m的薇菜生长地,采摘成熟孢子叶,小心放入光滑的纸袋里,干燥1~2d,孢子囊开裂散出淡绿色的粉末状孢子,立即接种或置于4~5℃冰箱中保存待用。
1.2诱导孢予萌发和原叶体形成
将绿色穗状孢子叶剪下,清洗消毒后,将孢子叶切成小段,接种于培养基(1/2MS+6-BA0.5+NAA0.01、PH5.8)中,置于温度25℃、光照12hr·d-1、光照强度2000lx的培养室中,7天后孢子大量萌发,逐渐形成丝状体和片状体,30天后可形成直径0.2cm左右的原叶体,
1.3原叶体增殖培养
将原叶体分切成小块接种到培养基(1/2MS+KT5.0+IBA1.0+磷酸氢二钾,200+活性炭0.5%、PH5.8)中,置于温度25℃、光照12hr·d-1、光照强度2000lx的条件下培养。60天后原叶体体积可增大6~7倍。
1.4诱导试管苗形成
将质地疏松、片状体块大、肉质厚的原叶体切成小块,接种到培养基(1/2MS+KT5.0+IBA1.0+磷酸氢二钾200+活性炭0.5%)上,经过90~120天的培养,可分化出现孢子体试管苗。将孢子体苗切成小块,转入壮苗培养基(1/2MS+IBA0.5+蔗糖20%),经过30天培养,苗高3cm左右、叶3~6片、根系变得较为粗壮时,即可取出炼苗。
2、薇菜试管苗炼苗管理
薇菜试管苗对自然环境的适应能力比较差。要使试管苗在土壤上生长且有较高的成活率,需小心移栽,精细管理。
2.1炼苗场地准备
炼苗一般在遮阳网搭建的荫棚中进行,以提供90%~100%相对湿度、散射光照、20~25℃温度条件。选择富含腐殖质的母土或山林土,并施入腐熟有机肥,混匀后晒干过筛,消毒待用。
2.2移栽及管理
把长到一定大小的孢子体试管苗从培养瓶中取出,用自来水轻轻洗去培养基,而后将小苗单株或3~4株一丛按行株距5cm×5cm栽入育苗土中,边栽边喷水边盖膜。移栽后严格管理,每天喷营养液2次,成活率可达95%。14天后可揭去小拱棚,30~50天后移入商品苗苗床培育。
3、薇菜试管苗大苗培育
选择土质疏松,排水良好,半阴半阳的坡地,每667平方米施入农家肥5000kg,深挖、耙细,做成宽1m,高10cm的高畦,将炼苗成活株高7~10cm的幼孢子体苗单株按10cm×10cm的行株距栽植,用土将根完全盖住,栽后浇足水。成活后每隔7天追施一次稀肥水,适时松土除草,入冬幼苗停止生长后,在苗床上盖5cm厚的稻草以越冬,次年春天萌发前除去覆盖物。幼孢子体苗在苗床培育1年,即可选择10~15cm高的秧苗栽入大田或出售。
作者单位:湖北省三峡职业技术学院生物工程系