衣原体(Chlamydia)是一种能够引起人类和动物共患性疾病的一种病原体,革兰氏染色阴性,它属于裂殖菌纲衣原体目衣原体科。是专性细胞内寄生物,于脊椎动物,偶尔也能在节肢动物体内分离到。国际委员会将衣原体分为4类:沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、肺炎型衣原体和反刍动物衣原体。沙眼衣原体有3个变种分别称为TRIC(引起沙眼和包涵体结膜炎)、LGV(引起性病淋巴肉芽肿)、MoPn(引起鼠类肺炎,最近也从猪身上分离到了相似的微生物)。沙眼衣原体变种有A-K共14种血清型,LGV变种至少有L1,L2和L3 种。经典的沙眼是由于A,Ba,B,C型引起的,包涵体结膜炎和生殖道感染是由D-K型引起的。网状体通过二分裂方式进行繁殖。经过18~20 h的DNA浓缩后,在囊内形成新的原生小体,这些原生小体在细胞发生自溶时被释放,释放出的颗粒又去感染其他寄主细胞。1 相关疾病衣原体引起的动物和人类急性传染性疾病,由衣原体引起的疾病主要有以下几种类型:1.1 衣原体性肺炎肺炎型衣原体可以存在于上皮细胞、巨噬细胞、内皮细胞和某些平滑肌细胞内,还具有在单核细胞、上皮细胞内繁殖的能力,能够引起动物和人的肺炎、咽炎、支气管炎、耳炎、窦炎。肺炎型衣原体引起的肺炎仅次于肺炎链球菌和嗜血杆菌型流感引起的肺炎。肺炎型衣原体不仅能够引起急性呼吸道感染,而且使肺炎复发率升高。肺炎型衣原体不仅能够通过呼吸道传播,而且通过手接触也可以。在人类主要表现为咽痛、发热、声音嘶哑、头痛、咳嗽等非特异性症状,有罗音,咳嗽较重,多为干咳,持续时间长。老年患者表现严重一些。1.2 鹦鹉热1879年,最初是由Ritter报告了该病,主要症状为高热、头痛、寒战。鹦鹉热衣原体可以感染17种哺乳动物及140余种禽类。这种疾病通常不会在人与人之间传染,人类的感染是通过接触禽类的排泄物或者渗出物传播。最普遍的形式就是通过吸入干燥排泄物的微粒感染。鸟类通常表现的症状是腹泻、羽毛粗乱、呼吸道疾病、粪便不成形。鸽子是衣原体最经常的宿主,衣原体在鸽群中长期存在主要是母鸽和雏鸽之间的循环。在没有并发或继发症的病鸽,剖检可见肝、脾肿胀,气囊肥厚,胃肠道充血、出血。隐性感染的老龄鸽子若复发,可见肝脏肿大、充血,肝实质中有弥散针头大坏死灶,脾脏异常肿大,被膜破裂、内出血。1.3 沙眼及包涵体结膜炎沙眼是当今世界致盲率最高的疾病。由于眼睛上皮细胞感染衣原体导致沙眼发生。1956年,我国学者汤凡如分离沙眼衣原体获得成功。沙眼最普遍的症状是慢性角质结膜炎,包含体结膜炎引起的是一种急性化脓性结膜炎。目前分离到的沙眼衣原体血清型有15个。沙眼能引起角膜瘢痕组织的形成,虽不具有致死性,但是致盲率很高。世界上感染此病并且致盲的病人数约400百万(WHO1984年数据)。感染方式主要是接触毛巾或者通过手指将病菌从一只眼睛带入另一只眼睛。苍蝇有可能也携带致病菌。在热带的一些地方,大多数儿童从两岁前就感染了该病。1.4 性病淋巴肉芽肿这是一种由衣原体引起的人类的接触性感染的性病。主要发生在热带及近热带地区。最普遍的症状是腹股沟腺炎的病灶。慢性症状为直肠炎,可以引起直肠狭窄,肛门和阴道瘘管脓肿。在发病的过程中出现全身症状,发热、头痛、发冷。1.5 猫抓热主要也是由于猫接触了混有衣原体的禽类排泄物引起。猫可能感染,但是并不表现明显症状。目前的报道主要存在于有猫抓史的人身上。病人被猫抓过,自愈后发病,表现为皮肤有小脓泡,或形成溃疡。局部疼痛,化脓、肿胀隆起。精神倦怠,恶寒,发热,四肢末端出现红斑。严重的会出现其他合并症,比如淋巴结肿胀,及心包膜炎症等疾病。2 诊断2.1 病料涂片染色 用Giemsa染色,可见EB呈现红色,RB呈蓝紫色。用Stamp氏法染色,结果是在淡绿色背景的衬托下,衣原体呈现鲜红色。碘染色(Rice)法时,低倍镜下,沙眼衣原体的包涵体由于含有糖原而呈现棕褐色,鹦鹉热衣原体的包涵体由于不含有糖原不被着色。电镜下,可以见到圆形或卵圆形颗粒,中央核心电子密度大,是EB;个体较大,中央核心电子密度低的为RB。2.2 分离培养 衣原体能够用鸡胚或其他组织培养。主要是染色检测包涵体或者原生小体。细胞培养不利的一方面是必需有可以被检测的器官,这就要求采样后要及时送到实验室,运输媒介要合适,不能混有青霉素,保持4℃或者液氮冷冻。2.3 抗原监测 荧光抗体染色可以检测原始小体,ELISA可以检测衣原体的抗原。2.4 抗体检测 微量免疫荧光试验和衣原体补体结合试验(CF)。2.5 核酸检测 衣原体感染时,分离培养不可行,所以只能检测抗原或者是核酸。用DNA或mRNA探针,或者用TMA、PCR或者LCR扩增基因片段检测被感染细胞。这些技术能够增强衣原体感染的可检测性,并且这些技术不仅适用于衣原体并发感染也适用于非并发感染。TMA法是一种恒温扩增核酸的方法,需要RNA逆转录酶和RNA聚合酶。在理论上可以把靶基因扩增109倍。将特异荧光标记的DNA探针与RNA扩增产物进行杂交保护实验后检测出荧光即可判断结果。LCR是将32P标记的寡核苷酸掺入反应体系,对扩增产物进行凝胶电泳后进行放射自显影。也可以使用市售的试剂盒LCx,对扩增产物进行微粒酶免疫法检测。LCR与PCR有相同的敏感性,且没有PCR的非特意扩增,可检测出EB,而不与其他型EB或RB起交叉反应。3SR(自我持续序列复制)法对16sRNA的扩增最敏感;Qβ复制酶技术基于RNA扩增的方法,由于衣原体内有多量RNA拷贝,所以敏感性和特异性都较高。2.6 血清学 尤其是对于呼吸道感染,已经应用了血清学检测。为了检测种间特异或者血清型特异的抗体,可以使用微量免疫荧光法检测来自各种衣原体株的抗原。3 治疗目前,疫苗的应用尚不成功,正在研制中的疫苗主要有减毒或灭活疫苗、亚单位疫苗和DNA疫苗。目前可以应用抗生素治疗衣原体感染,治疗方法强调强效持续,一般应进行2~3周的连续治疗。美国CDC推荐了一种人的治疗方案:(1)口服红霉素500 mg,每天4次,服用7天。(2)低度耐药者口服红霉素250 mg,每天4次,服用14天。(3)口服阿莫西林胶囊500 mg,每天3次,服用7天。(4)配偶也需要进行治疗。中国衣原体肺炎的治疗方案为:红霉素或者四环素类药物口服,成人每天2 g,连用2周。新生儿和婴儿红霉素每天40 mg/kg,疗程为2~3周。治疗中要注意不能使用青霉素,四环素类药物和大环内酯类药物有造成二重感染和肝肾损伤的危险,小心使用。另外,对于肠道内的衣原体,抗菌药物是难以清除的。4 预防积极进行该病的预防,消灭害虫、啮齿类有害动物,防止将病原输入。人类与动物接触时要注意进行必要的防护,防止带病动物向人的传播。发病后,要及时隔离病畜,给予积极的治疗,对周围环境进行彻底的清扫消毒。有必要实行全进全出制,发病动物所在的群体如果必要应该进行全群淘汰。有关人员要减少流动,防止疾病扩散,对相关人员的健康状况进行监测。根据衣原体的生物学特性,常用消毒药就可以起消毒作用。禁止从疫区引进动物。对于引进动物的区域卫生情况要进行调查,了解当地的发病情况,确保安全。对于饲养宠物的人,一定要注意卫生,避免被动物咬伤、抓伤,万一被抓咬后,要及时就医,防止继发疾病。