临沂市一农户饲养的500余只鹧鸪发生了以呼吸困难、下痢、神经症状、急性死亡为主要特征的疾病,死亡123只,死亡率24.6%以上,给其造成较大的经济损失,笔者通过临床检查、实验室检验等,确诊为鹧鸪的新城疫并发葡萄球菌病,采取中西结合综合防治措施,控制了病情,现将诊治情况报告如下。1 发病情况据某农户自从引入500余只鹧鸪以来,生长状况一直良好,但没有按程序进行预防。在6周龄左右个别小鹧鸪发病,以后逐渐增多,并出现严重的死亡现象,最高峰期1天死亡17只。发病后当地兽医曾用青霉素、链霉素均按5 000 u/只饮水治疗,药后不但未见好转,发病数量反而增多,病情加重,并出现死亡增加现象。2 临床症状急性未显症状即突然死亡。病程稍长的表现精神不振,体温升高,可达43℃,食欲减退或废绝,羽毛松乱无光,两翅下垂,常蹲伏或呆立一处;呼吸有啰音,不愿走动,缩颈、闭眼昏睡;有的眼睑肿胀,有分泌物;有的下痢,排灰白色或绿色粪便;大部分在胸腹、大腿内侧和两翅膀出现浮肿,外观呈紫色或紫黑色;有极少数出现跖关节、趾关节肿大,并表现跛行;有的共济失调、头颈扭曲、转圈运动等神经症状,最后瘫痪倒地,衰竭死亡。3 病理变化剖检主要表现:部分病例在胸腹部、大腿内侧肌肉呈片状出血,呈紫红色的花斑;有的跖关节、趾关节关节囊内有炎性渗出物;部分病例心包内有少量淡黄色的积液和心外膜出血;肝脏肿大,有紫红色花斑;脾脏肿大;十二指肠有轻度出血;直肠卡他性炎症;肺瘀血、水肿;大部分气管及喉头有黏稠微黄色的分泌物;腺胃黏膜有卡他性炎症,腺胃乳头有明显的出血点;盲肠扁桃体肿胀出血;有的腹部及胸前部皮肤呈绿色,皮下有淡黄色胶胨样渗出物等病变。4 试验室诊断4.1 细菌学检验4.1.1 病料涂片镜检 无菌取皮下水肿处渗出液、心血、肝脏、脾脏等组织分别直接涂片,革兰氏染色,镜检,见有数量不等的革兰氏阳性球菌,单个、成双、或典型呈葡萄串状。4.1.2 细菌分离培养 取新鲜病死鹧鸪的皮下渗出液、肝脏、脾脏等组织按常规分别接种于普通琼脂和鲜血琼脂平板上,置37 ℃恒温箱中培养24 h,挑选菌落进行纯培养后,分离到金黄色葡萄球菌。在普通琼脂培养基上形成圆形、稍隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐不透明的菌落,直径1~2 mm,将其放置1~2 d后,菌落呈淡黄色或金黄色;在血液琼脂培养基上,菌落周围有溶血环。菌落涂片,革兰氏染色、镜检,见有革兰氏阳性球菌,成典型的葡萄状。4.1.3病原菌的生化试验和凝固酶试验 将纯培养物分别进行葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇的发酵试验,全部产酸不产气。用玻片法进一步作凝固酶试验,将分离的纯培养与兔血液在玻片上混合,结果血浆中有明显颗粒出现,呈阳性反应。通过以上实验,证明分离的病菌为金黄色葡萄球菌。4.1.4 药敏试验 用常规纸片法对分离的金黄色葡萄球菌进行药物敏感试验,结果对丁胺卡那霉素、氨苄青霉素、恩诺沙星高度敏感;对其他都表现一定程度的耐药性。4.2 病毒检验4.2.1 血清学试验 随机对鹧鸪群采血12份,进行ND和HI试验。结果其HI抗体为0~4 1og2,表明鹧鸪群已潜伏NDV感染。4.2.2 病毒分离及HA、HI试验 取新鲜病死鹧鸪的脑组织,研磨制成组织匀浆,加双抗处理后,接种10日龄鸡胚,并继续孵化96 h,每6 h验蛋1次,剔除24 h内死胚蛋,收集活胚及死胚尿囊液,继续盲传3代。结果,传至第2代,鸡胚胚体出现出血病变,至第3代出现死亡。用每代收获的鸡胚尿囊液。按β-微量法进行血凝试验,并在出现血凝性后,分别用兔抗NDV阳性血清和禽流感阳性血清进行血凝抑制试验。结果表明,病料接种鸡胚传至第2代,尿囊液出现血凝现象,至第4代,血凝价可达7 1og2,且血凝现象能被NDV阳性血清特异性抑制;禽流感病毒阳性血清却无产生抑制作用,说明所分离的病毒为NDV。4.3 动物回归实验选用10日龄的健康罗曼肉雏鸡代替鹧鸪12只,随机分为2组,一组为对照组,另一组为试验组。用分离的葡萄球菌株24 h肉汤培养物每只鸡肌肉注射0.5 ml;同时用分离的4代鸡胚尿囊液滴鼻。24 h后试验组开始发病,体温升高,在发病后2~4天死亡4只,存活2只;其临床症状和解剖特点与发病小鹧鸪基本相同,并检测到上述同样的细菌和病毒。而对照组无一发病死亡,全部存活。动物回归试验说明鹧鸪被葡萄球菌和新城疫混合感染。5 综合防制措施5.1 首先对病鹧鸪进行隔离,加强舍内通风,并用3%的过氧乙酸进行室内带鹧鸪彻底消毒,环境用3%的热火碱溶液喷洒消毒,1次/天。对尚未发病的鹧鸪进行紧急预防接种新城疫疫苗,4~5倍量滴鼻,同时肌肉注射新城疫油乳剂灭活苗0.3ml。为预防继发感染,选用敏感药物恩诺沙星50ppm配合电解多维饮水预防,2次/天,连用5~7天。5.2 采取中西结合的综合治疗措施进行防治。5.2.1 新城疫高免卵黄2~5ml,一次肌肉注射;同时肌肉注射氨苄青霉素50000 u/只,维生素B1注射液,1ml/只,2次/天,连用3~5天。5.2.2 电解多维和丁胺卡那霉素混合液饮水,直到控制病情为止。5.3 中药用金银花20g,连翘20g,大青叶20g,板蓝根20g,黄连15g,黄芩15g。混合水煎,供50只鹧鸪1天饮水或拌料喂服,直到控制病情。经过及时的综合治疗措施,3天后病情开始好转,7天后恢复正常。6 小结6.1 对于葡萄球菌与新城疫的混合感染性疾病,应及时作出诊断,及时采取综合性的防治措施,才能控制病情发展。特别配合一定中药治疗,防治效果会更有效。在抗菌药的使用上,最好通过药敏试验,才能达到事半功倍的效果。6.2 新城疫是多种禽类的烈性传染病,也是严重危害鹧鸪的病毒性传染病之一,如预防措施不当或疏忽,一旦发病,死亡率较高,会带来较为严重的损失,因此,应按有关规定的防疫程序进行新城疫的疫苗预防,这是防止本病发生的有效措施。葡萄球菌病是由金黄色葡萄球菌感染引起的传染病,对鹧鸪的危害也较大。葡萄球菌广泛存在于自然界中,如果饲养环境恶化,将会引起葡萄球菌的大量繁殖,感染发病,所以,平时应加强管理,防止葡萄球菌病的发生。