试情法：根据雌性动物在接近雄性动物时的亲疏行为表现来判断其发情程度。如果母畜愿接近雄性动物，弓腰举尾、后肢开张、频频排尿、有求配动作等即为发情。而未发情或发情结束后则表现远离雄性、当强行牵拉接近时，往往会出现躲避行为甚至踢、咬等抗拒行为。试情公畜一般选用体质健壮、性欲旺盛、无恶癖的非种用公畜套上兜布进行试情；对经济类动物可直接进行放对观察。
外部观察法：主要观察母畜的外部表现和精神状态，从而判断其是否发情和发情程度。母畜发情时常表现精神不安、爱走动、食欲减退甚至拒食，外阴部充血肿胀流有粘液，对周围环境或雄性动物的反应敏感。不同动物有各自的特殊表现，如母牛发情时哞叫，爬跨其它母牛；母猪闹圈；母马扬头嘶鸣，阴唇不断外翻闪露阴蒂；母驴有叭哒嘴等表现。
阴道检查法：采用阴道开张器或扩张筒插入母畜的阴道内，观察其阴道粘膜的色泽和充血程度、子宫颈的驰缓状态，子宫颈外口开口的大小和粘液的颜色、分泌量及粘稠度等，以此判断母畜发情的程度。检查器械须经灭菌消毒，插入时需应小心谨慎，以免损伤阴道壁。猪、牛、羊等家畜可试用粘液的涂片结晶法。阴道的周期性充血与排卵有一定的关系，子宫颈管开放程度的变化可作为很好的判断依据。
直肠检查法：该法就是用手壁伸进母畜的直肠内，隔着直肠壁通过用手指触摸卵巢及卵泡的变化。触摸卵巢的大小、形状、质地、卵泡发育的部位、大小、弹性、卵泡壁的厚薄以及卵泡是否破裂，有无黄体等。此法可根据卵泡的发育程度比较准确地判定发生排卵的时间，从而科学的决定适宜的配种时间，以减少配种次数，降低费用，提高受胎率。因此，直肠检查法已在大型的家畜配种上被广泛应用。此法要有娴熟的直检技术和经验者才能进行直检，该法劳动强度大，对未掌握此项技术人员需经培训后才能检查，以防失误。
另外，母畜发情鉴定还可采用生殖激素检测法、离子选择性电极法、仿生学法、宫颈粘液结晶法、颜色标记法、子宫颈粘液透析法、阴道上皮细胞抹片等方法。
