我们在进行了文蛤规模化人工育苗的同时，对文蛤亲贝的强化培育、人工催产、胚胎发育、幼虫生态习性等方面进行了较为系统的试验研究，掌握和累积了比较完整的技术资料，对文蛤规模化工人育苗、苗种培育技术的推广和自然海区文蛤苗种繁育与保护具有参考和实用价值。现将情况报告如下。1 材料与方法1.1 亲贝试验所用的亲虫取如东海区所产的三龄文蛤，新鲜无损，活力强。4月中旬置室外进行人工强化培育，培育期间的平均水温26.4℃（20℃～29℃），比重1.020，饵料生物保持20万个c以上/ml，每天换水一次，连续充气增氧。1.2 孵化池、育苗池利用本部吕滨省级水产苗种场的闲置河蟹育苗池做文蛤规模化人工育苗的孵化与培育池。1.3 海水人工育苗前期用水经暗沉淀处理，后期使用经筛绢网过滤的自然海水，比重范围为1.015～1.020。1.4 人工催产方法阴干、流水、加氨海水浸泡和升温。1.5 胚胎、幼虫生态试验所用的高比重海水采用添加饱和食盐水，低比重海水加淡水配制而成。1.6 幼虫生态试验的控温装置继电器、电热棒、小气泵等设备组装而成。1.7 饵料生物面盘幼虫期全用人工培养的单细胞藻类，如金藻、牟氏角毛藻、扁藻、异胶藻。投喂时饵料新平，处指数生长期。后期有时投喂一些商品代用饵料（如鲜酵母、小球藻粉等）但订以人工肥水解决幼苗的饵料。1.8 生物检测按常规生物学检测方法进行。2 试验结果与关键技术2.1 繁殖习性文蛤雌雄异体，两年性成熟，江苏南部沿海文蛤繁殖期为6月下旬到8月上旬。成熟期的雌性性腺呈乳白色，雄性呈奶黄色。性腺分布在内脏团周围，并延伸至足的基部。卵沉性，圆球形，卵径为72～90μ，初级卵膜外有一层胶质膜，称次级卵膜。精子头部一边稍凹，呈狭茧形，长约3μ。三龄文蛤的怀卵量约200万粒左右。分期成熟，分批排放，在海水中受精孵化、变态生长。2.1.1 文蛤繁殖盛期雌雄性比观察文蛤繁殖盛期我们解剖800只三龄文蛤观察性比，雌性为410只，雄性为390只，雌雄性比约为1∶1。2.1.2 海区亲贝与人工强化培育亲贝性腺发育情况观察比较4月27日、5月23日、6月8日分别从海区和人工强化培育池取文蛤100只，进行肥满度和性腺发育情况比较，结果见表1、表2。从表1、表面化可看出：通过人工强化培育，亲贝的肥满度和性腺发育情况，都比海区亲贝好得多。2.2 人工催产：催产宜在干燥的气候条件下进行。先将取回的亲贝阴干刺激3～5小时；然后将阴干刺激后的亲贝进行2～3小巧玲珑时的流水冲击；最后将亲贝放入0.15‰～0.25‰浓度的氨海水中浸泡（以市场上出售的25%～28%分析纯氨水作为100%加过滤海水配制到所需要的浓度）。亲贝接触氨海水后，反应相当敏感，在氨海水中浸泡不到10分钟就开始张壳。水管和足全部伸展舒张，显示出兴奋状态。这是排放前出现的生殖现象。亲贝在氨海水中经过约30分钟的浸泡刺激，先后开始出现排放，当出现雄性先排放时，在精子的诱导下，雌贝很快相继出现排放。排放时，雄贝出水管喷射出烟雾状浅黄色的精液，很快使水体变得混浊。雌贝从出水管排放出乳白色的卵粒或卵块，沉淀于水底。6月18日从海区和室内强化培养池中各取30只亲贝，进行人工催产效果比较，结果分别为34%和56%，即通过人工强化培育的亲贝、经过人工催产后，排放率高于自然海区亲贝22个百分点。6月29日到7月6日，先后进行9批催产。排放的亲贝共计138只，见表3。第7～9批采用升温的方法。把经过阴干刺激，流水冲击的亲贝在0.20‰氨海水中，用升温和常温两组不同的温度条件作比较观察，升温是用电热棒直接加热，这种试验共进行三次。第一次试验亲贝700只，分7个组，6个常温组的水温为21℃，一个升温组，水温在半小时内，从21℃逐渐升至27℃，每组放亲贝100个。试验结果，6个常温组中没有出现排放的亲贝，在升温组中，当水温升至26℃时，出现大量排放，相当集中，计有51只亲贝排放，获得明显结果。第二次试验亲贝100只，升温组和常温组各50只，第三次与经二次相同，试验结果：第二次常温组出现6只排放。结果见表4。在人工刺激催产过程中，我们还观察到亲贝排放的潜伏期长短不一，差别较大，有的在海水仅30分钟就出现排放，有的和达2小时30分钟才开始排放，同时还观察到亲贝排卵放精的时间也有差异，有的连续排放时间长达45分钟之久，但有的仅排放短暂时间就中止。2.3 人工育苗：8月2日，在本部启东吕滨苗种场，利用闲置的1号大棚450m2，共15只育苗池，作为文蛤规模化人工育苗池，17：00时从亲贝人工强化培育池中取195市斤亲贝，经阴干4小时，流水2小时，加氨海水浸泡20分钟，然后置8#、9#、11#、12#池进行排放。8月3日1：40时，亲贝开始排放，2：00大量排放，2：10虹吸一半到16#、15#、1#、3#池，计算卵量达90个亿，卵径80μ，整齐，洗卵三次。11：00发育到原肠期，开始转动上浮。15：00发育到担轮幼虫，18：00大部分发育到d形幼虫，开始分为10个池培育，分池后，投放的密度为14个/ml，总数约44个亿粒。前三天只加水，投饵，三天后开始换水，保持水质新鲜。单细胞藻投喂量在10万个c左右/ml，8月10日初生足形成，这时的幼虫大小在200μ左右，数量约35亿。d形幼虫到壳顶后期幼虫的存活率79.6%。7月16日检测，个体达到350μ，数量达32亿粒，这期间幼虫分泌粘液量较多，容易造成幼贝与砂粒裹在一起，引起死亡。因此采取加大换水量，排尽池水后，用水龙头冲翻底质等措施，保持幼虫壳表干净，对提高幼虫的成活率十分重要。8月26日，个体壳长达到0.6mm，此时出水管形成。2.4 关键技术通过文蛤规模化工人育苗项目的实施，总结得出以下技术关键。（1）亲贝的强化促熟培养。文蛤人工育苗的成功，首先必须建立在亲贝生殖腺充分成熟的基础上，才能获得大量的成熟卵，保证人工育苗的顺利进行。因此，亲贝的强化促熟培养非常重要。目前文蛤人工育苗所用的亲贝主要来源于自然海区。在文蛤自然繁殖季节前，到海区选择壳表新鲜、无损、活力强、性腺发育较好的三龄文蛤，放置亲贝暂养池进行强化促熟培养。运输亲贝最好在夜间进行，途中不要淋雨，不要碰到油渍的东西，避免碰撞。亲贝强化促熟培养管理要求是：海水比重1.018～1.020，ph值8.3，溶解氧不低于6.8mg/l，温工控制在26℃，每天彻底换水一次，并冲洗底质，去除排泄物，换水后投喂饵料，饵料生物量不低于50万个藻c/l水体，选用的饵料生物最好是海区的油泥或人工培养的底栖硅藻。连续冲气培养。定期观察亲贝性腺发育情况，掌握好育苗的时间。亲贝性腺发育情况检查方法：①肉眼观察法：解剖后，肉眼可见发育好的亲贝性腺饱满、覆盖整个内脏团表面，雌性（♀）性腺呈乳白色，雄性（♂）呈奶黄色。用解剖刀挑出一点腺体放在载玻片上、用滴管滴上两点海水，雌性遇水后，即散开，呈均匀微粒，雄性呈烟雾状。②镜检：把上述所做的载玻片放在光学显微镜下，成熟的卵圆形或椭圆形，精子游动活泼。文蛤人工育苗时亲贝德用的数量比用量多一倍。每茬每立方米的育苗水体需要亲贝10个（♀），繁殖盛期的雌雄性比一般为1∶1。（2）人工诱愤。文蛤人工育苗的繁荣一步骤，就是怎样能获得大量的成熟卵。获卵的诱导方法较多，有机械振荡，流水冲击，阴干，阳光暴晒，升温或降温，电流刺激，改变盐度和光照，改变ph值，紫外线照射，注射化学药品以及精液诱导等。通过多年的试验与探索，文蛤人工诱导的最佳方法为：阴干（3～10小时），流水刺激（2～3小时），加氨海水浸泡，其浓度为0.15‰～0.31‰，升温（3℃～5℃），亲贝的排放率可达到50%以上。（3）受精卵的多次清洗和上浮幼体的优选。通过人工的诱导获得的受精卵都经过多次清洗，去除多余的精液和沉淀较慢或破碎的卵等，选留沉淀较快的进行孵化。孵化用水要清洁，在水温为24℃、比重1.018、ph为8.1的环境条件下，经8小时的静水孵化，进入原肠期，逐渐上浮水中。胚胎上浮后，及时吸取上浮早且发育较为一致的幼体衡释后继续培育。（4）浮游幼虫择优培育。当胚胎发育到d形幼虫阶段时，选留浮游活泼，壳缘圆滑，绞合部平直，生长一致的幼虫按一定的密度移入幼虫培养池进行培育。幼虫培育期间，每天观察幼虫的浮游、摄食和生长情况，发现异常如沉底等情况及时分析解决，没有培养前途的一律弃去。（5）掌握适宜的幼虫培育密度。经过选留的d形幼虫移入培育池中培育，培育密度不宜太高，一般控制5～7个/ml，出苗率可以达到70%。（6）幼虫培育时连续充气增氧。幼虫培育用的海水一般都经过一段时间暗沉淀。沉淀过程中由于生物耗氧等原因，往往引起沉淀海水的溶解氧明显下降。据检测，经过暗沉淀的海水最低溶解氧为0.225mg/l。故幼虫培育用沉淀海水应先曝气，待溶解氧升高后再使用。采取连续充气，既达到了增氧的目的，也搅动了水体，有利于幼虫的发育和生长。（7）掌握适宜的饵料投喂量。当d形幼虫消化道完全形成后，应及时投喂饵料，每天换水后投饵。前期幼虫投喂数量控制在10万个c/ml水体，后期应增加到20万个c左右/ml。（8）敌害生物的防除。敌害生物的防除主要采取以防为主的原则，培育幼虫用的海水经沉淀、过滤，或用5～10×10-6浓度的漂白粉处理。适量使用土霉素等抗菌素，可抑制幼苗的大量繁殖，利于幼虫发育生长。（9）幼虫进入变态期时应及时移入幼苗培育池继续培育。当文蛤幼虫壳长长到约150μ时，就要注意幼虫是否已形成初生的棒状足。发现少量壳顶后期幼虫面盘萎缩或消失，及时将其移入幼苗培养池继续培育。3 讨论3.1 经过几年来在文蛤催产试验中所观察到的情况，对性腺肥满成熟的亲贝，在干燥炎热的气候条件下，用阴干刺激、流水冲击和氨海水浸泡三结合的方法，基本上能获得良好的催产效果。在亲贝性腺完全成熟的情况下，即使未经氨海水浸泡，仅经过干露刺激和流水冲击，也能获得大量排放，如果亲贝在氨海水浸泡的同时，再结合升温刺激，能获得更明显的催产效果。文蛤人工催产的成败关键，取决于亲贝性腺的成熟度，对于性腺已达成熟的亲贝，经过必要的外因条件刺激后，很容易达到催产的目的。反之，对于性腺不是充分成熟的亲贝，任凭如何刺激也不会引起排放反应。但是值得注意的是，由于亲贝性腺成熟变化是随气候和海况因子的变化而改变，可能出现性腺提前成熟或推迟成熟的现象，干旱炎热的气候条件对刺激催产有利，而阴湿多雨、气温低的气候条件不利于人工催产。因此，结合当时海况和气候的具体条件，并对亲贝进行性腺解剖检查，准确掌握繁殖高峰期和亲贝性腺成熟度，乃是达到理想催产目的的重要前提。室内进行亲贝强化培育，克服了亲贝性腺成熟受外界自然海洋环境的束缚。只要管理措施跟上，亲贝的成熟比海区提早一个月，催产效果提高22%。3.2 文蛤受精卵孵化和幼虫的生长发育、变态、受各种外界条件的影响，其中水温是一个重要的因素。王维德等在水温26.5℃～33.0℃条件下由受精卵培育出文蛤的幼苗，与此同时，辽宁省金县水科所陈献增在水温24.5℃～28.0℃条件下也育苗成功，我们的实验表明：文蛤受精卵孵化以及幼虫生长发育和变态的适宜水温约在24.9℃～31.4℃之间，其中以26.8℃为最佳，温度低至22.5℃时，受精卵的孵化速度减慢，但不影响孵化率，温度高达33.3℃，不仅受精卵的孵化速度减慢，孵化率也明显下降，35.5℃不能发育成d形幼虫。实验结果为人工育苗时水温的控制提供了依据，也为确定文蛤繁殖的最适水温提供了依据。由于文蛤的受精卵孵化和幼虫浮游生活的时间在适温条件下一般不超过1周，自然海区文蛤繁殖期的最适水温是文蛤受精卵孵化、幼虫生长发育和变态的最适水温，因此有的报道中将文蛤繁殖期的最适水温定为21.5℃～25.5℃是欠妥的。3.3 文蛤受精卵孵化以及幼虫生长发育和变态对光线的适应性很强，实验范围内，无信纸光线接线员弱，照光时间的长短都未见明显的影响。这就为人工育苗时光线的控制提供了便利。3.4 文蛤幼虫对饵料藻类的种类要求并不十分严格，但由于文蛤育苗阶段水温较高，因此要求选择那种在较高温度条件下能正常生长繁殖的单细胞藻类作饵料，我们所使用的金藻、牟氏角毛藻、扁藻等种类都能符合上述要求，鞭余种类有待于选择。实践表明，文蛤规模化人工育苗时，只要培育好1～2种单细胞藻类就能满足需要。此外，在育苗中还曾发现，用生长停滞期或下降期的藻液投喂幼虫时，幼虫则停止生长，甚至引起死亡，故保持藻类饵料的新鲜非常重要。
