人工培育珍珠可分为无核、有核、象形、异形、彩色珍珠和夜明珠的培育。育珠手术技术是人工培育的关键,技术水平不过关,会严重影响育珠产量和质量,甚至造成育珠生产失败,出现全盘皆输的结局。为杜绝此类情况发生,更好地为养殖户服务,本文详述无核珍珠培育的手术操作方法和技术。
1、制备小片
小片是珍珠形成的物质基础,小片的质量直接关系到珍珠是否能够形成及其品质的优劣。取片部位和小片形状、大小、厚度及小片的制作技术对育成珍珠的产量和质量产生重大影响。手术操作如下:
1.1剖蚌 用开壳刀切断小片蚌前、后闭壳肌,蚌壳张开,洗净外套膜、内脏团等处的污物。切勿弄伤外套膜的边缘膜,让其完整地贴在蚌壳内。
1.2分膜 将边缘膜的内、外表皮分开,取边缘膜的外表皮制备细胞小片。内、外表皮分开的手术方法有剥膜法、撕膜法、削膜法三种。
1.2.1剥膜法 即在蚌壳上剥离边缘膜切取外表皮。用剪刀在边缘膜前或后闭壳肌附近剪开一个小口,一手用镊子夹住内表皮,一手用通道针插进内、外表皮间,两手配合,边前伸边分离,直至内、外表皮全部剥离。剥离过程中,通道针尽可能偏向于外表皮一侧,使外表皮少带结缔组织,得到厚薄较均匀的小片条。然后用切片刀切下外表皮,用镊子夹取置于玻片上,注意珍珠分泌面朝上放置。
1.2.2撕膜法 即先切取边缘膜,外表皮朝上放在玻片上,用镊子压住内表皮一端,用平头镊子夹住同一端外表皮,顺着组织结构向后轻轻撕拉,使内外表皮分离。撕拉时用力要均衡,防止小片条撕断或撕裂。
1.2.3削膜法 用锋利的解剖刀从边缘膜的前端或后端开始,徐徐削去外套膜内表皮和结缔组织,然后切取外表皮置于玻片上。
实践证明,剥膜法操作难度不大,容易掌握,但易损伤外表皮细胞,所制得小片厚薄不均,影响珍珠的产量和质量。撕膜法是目前生产中最常用方法,技术难度较大,小片厚薄较均匀,损伤较小,质量高,育成珍珠的光泽、形状及产量均属上乘。削膜法操作难度大,速度慢,一般只适用于褶纹冠蚌、背角无齿蚌制片。三种分膜手术效果和形成珍珠(育珠蚌为三角帆蚌)的性能对比见表1。
表1不同分膜手术效果和形成珍珠的性能对比
方法 移植手术 成珠速度 珍珠形态 珍珠质量
剥膜法 容易 慢 良 良,较圆
撕膜法 方便 快 优 优,圆
削膜法 困难 快 异形 颗粒大,光滑
1.3整形和切片 把外表皮的正面(贴壳一侧的珍珠分泌面)朝上,反面(结缔组织面)朝下,平展在玻璃板上,用切片刀修整使之厚薄均匀,形状整齐,尤其是切除边缘膜有色边缘和残留在边缘膜内侧的外套膜肌。切制小片的规格一般为3mm×4mm或4mm×5mm。
1.4润片 小片制成后,滴注保养液,保持小片湿润,维持细胞内、外渗透压平衡,增强细胞小片活力和抗菌功能,提高细胞小片移植成活率。
注意事项:制备小片动作要细致、轻快、熟练,切勿伤及外表皮细胞;所有工具使用前用75%酒精棉擦拭消毒;制片过程防止阳光直射,以免影响小片的活力;保持小片湿润;整个制片过程在3~5min内完成,保持细胞的生命力,避免因操作时间过长而造成小片干燥死亡。
2、插植小片
制备小片后,立即插植入育珠蚌外套膜的结缔组织中,使其愈合为一体。小片插植的步骤:开壳"固定"清洗外套膜"拔鳃"取片"创口"送片"整圆"换侧植片"拔塞"备养。
2.1开壳、固定 育珠蚌腹缘朝上置于手术架上,用开壳器轻轻插入育珠蚌两壳之间,慢慢撑开,两端插入固口塞固定。注意开口宽度依蚌体大小而定,壳长10cm以上蚌体一般不超过1.0cm。
2.2洗膜、拨鳃 清水荡洗外套膜及内脏团污泥后,用鸭舌板将鳃瓣和内脏团拨向暂不插片的一侧。
2.3插片(取片、创口、送片) 插植小片有横插法和直插法两种。
2.3.1横插法 左手持送片针轻轻点住小片正中央,右手持钩形开口针将小片卷叠在送片针的圆头上,使小片包裹成囊袋状,再用开口钩针在外套腔的中央膜上横向创口,同时左手挑起小片顺着创口送入外套膜的内、外表皮之间的结缔组织中,退出钩针在内表皮外面压住植入的小片,退出送片针。横插法具有操作方便、便于整圆、成珠率高、圆度好、插片数量多等优点。
2.3.2直插法 在外套膜上竖向创口,将小片与育珠蚌腹缘成垂直方向插入。直插法操作简便,可移植较大的小片,但插片数量较少且容易掉片。每只蚌的植片数目,视蚌体大小而定,过大会造成育珠蚌负担过重,营养供应不足而死亡;过少则影响产量。一般6~8cm蚌体植片2~3排,10cm以上蚌体植片4排,两侧外套膜上可植片30~40片。小片插入深度0.5~0.8cm,片间距0.5~1cm,植入的小片呈梅花型排列。
切记送片要稳、轻、准。“一送到位”即一次将小片植入,避免多次插入,切忌穿膜,防止出现附壳珠。
2.4整圆 当小片植入外套膜中,随即用整圆器或钩针在内表皮外面顺势往前拉,整理小片成鼓状突起。
2.5换侧植片 一侧外套膜上的手术完成后,调换育珠蚌方向,用鸭舌板将鳃瓣和内脏团拨到已手术的一侧,进行另一侧的小片插植。
2.6拔塞、备养 手术完成时,向壳内滴加抗菌保养液,防止伤口发炎,促进愈合。拔出塞子,将育珠蚌暂养于微流水池中,观察一段时间后,集中移至培育池中饲养。