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微藻培养物如何定量

2019-01-04 13:38:11浏览:647评论:0 来源:山村网   
核心摘要:在微藻的培养过程中,或在微藻作饵料投喂时,要经常对微藻的生长量进行测定,主要方法有:细胞计数法、干重法、光密度法、压缩体
在微藻的培养过程中,或在微藻作饵料投喂时,要经常对微藻的生长量进行测定,主要方法有:细胞计数法、干重法、光密度法、压缩体积法、叶绿素法、C14法和氧产量法等,但用得最多的是细胞计数法;比较精确的是干重法,快速方便的是光密度法;生产中实用的是压缩体积法,因为微藻作为饵料用时,一般都是以活体投喂,所以干重法只用于实验室的精确测定,而生产中不常用。

细胞计数法可用自动颗粒计数计,各种计数框和血球计数板等。国内常用的是BX-K-25型血球计数板,每片计数板上有下两个计数池,每个计数池由9个大方格组成(四周8个大方格,每个又分划成16个中方格;中间的一个大方格则分成400个小方格)每大格的面积都是1平方毫米,的空间,所以在这1大格中计数到1个藻细胞,即表示1毫升水体中含有10000个藻细胞。每个计数池我们取对角线上的大方格计数。共5个,每片计数板共计数10个大方格,重复3次,,则将30个朋方格内计数到的藻细胞数,取其平均值,即表示该藻液样品的藻细胞密度。列如:计数1个扁藻的样品。30个大格内计出的藻细胞平均数为45个细胞/格,就知道该样品的细胞密度为45乘104个细胞/毫升。

虽然用光密度法测定的OD值随微藻的培养条件、生长状况等不同而有一定的误差,不能完全与实际的藻细胞数目对应,但该法方便快速,所以在测定大量样品时,还是值得推广的。一般用国产721型分光光度计(测定波长范围360-800毫微米)就可以,只要选择在各类微藻的吸光度最大的波长上进行测定,而吸光度值的范围尽量选用在0.1-0.8之间,就可以得到较高的准确度,各类微藻测定时的参考波长(毫微米)为:蓝藻类560;绿藻类665;硅藻450,金藻类450。

随着水产动物苗种生产的集约化程度的提高,单位水体密度的不断增加,所需的饵料数量也不断增加,因此,就不可避免地将讲道德 多微藻培养液带入育苗池中,在培养液中不但有许多氮、磷、铁等营养元素,而且还含有微藻的代谢产物,这些物质对动物幼体生长发育有严重的危害。投喂时应尽量将培养液除去。所以日本水产界在动物的苗种生产中,结合除去微藻培养液的操作程序,引入一种“压缩体积”的计数方法,即将微藻悬浮液装入有刻度的离心管中,在离心力为1500克下,离心30分钟,测出浓缩后的微藻体积,其计量单位为立方厘米(毫升)/升。在投饵时,平时都以升藻液/立方米育苗水体计算,如用压缩体积,则根据测出的数据,换算成所需的浓缩藻泥的体积进行投饵。例如原来每立方米育苗水体需投藻液20升,而测量的这种藻液的压缩体积为2.2立方厘米/升,则需投浓缩藻泥44毫升。

底栖硅藻的计数有两种方法。一种是取一定面积的附着基,将上面附着的藻细胞全部洗刷下来,放入一定体积的海水中,充分搅匀分散后,用血球计数板计出单位体积中的细胞数,再换算成单位面积附着基上的藻细胞数。另一种方法是将附着基,特别是透明的玻片,聚乙烯板或薄膜,直接在显微镜下测定出附着基的面积和上面附着的硅藻细胞数。底栖硅藻定量时的常用计量单位是个细胞/平方毫米。
(责任编辑:小城)
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