乌鳢繁殖关键是看水温，一般水温达到20℃以上，较稳定之后就可以进行繁殖。为了达到更好的繁殖效果，在繁殖前20天左右需进行一次性腺成熟情况的检查。方法是将亲鱼池水排干，进行逐条检查亲鱼的性腺成熟程度，并按程度好坏分池放养。成熟度低的可以注射催熟剂，注射后单独放养，继续强化培育，定期冲水刺激等，并按雌雄比例1:1为标准补缺，落实生产计划。
检查性腺时最大的困难是雌雄鉴别。乌鳢的第二性征差异不明显，从外形上很难鉴别。特别是乌鳢人工繁殖时要采取对组繁殖（单繁），因此雌雄的鉴别十分重要。如果有一尾亲鱼选错，那么这一组就不可能进行繁殖。在此介绍乌鳢雌雄鉴别的几个外形特征：一眼看去，雄鱼与同长的雌鱼相比，腹部较瘦，身体较狭长一些；雄鱼背鳍和尾鳍比雌鱼要宽长一些；体色较深黑，成熟时腹部两侧多数呈暗紫红色；生殖孔白色较为狭小。仔细观察：在3月下旬至4月乌鳢的性器发育已进入第3期末第4期初，逐步趋向成熟。雌雄鱼的特征是：雌鱼的生殖孔突出，呈鲜红色，红色而逐渐扩大成圆形，椭圆形，直径约0.6～1厘米，生殖孔较小则尚未成熟。成熟的雌鱼胸腹白色膨大丰满，腹部向上，圆而松软，中间凹陷，卵巢轮廓明显；胸鳍、腹鳍黄白色、灰白色。雄鱼身体两侧体色成暗紫红色，腹部有较多的黑色斑点，肥软，比雌鱼瘦小。生殖孔稍有扩大，呈微红色，胸鳍、腹鳍具蓝黑色的条纹。雄鱼比雌鱼的体色黑而鲜艳。雌雄亲鱼的区别见下：
1.体形：雌鱼腹部膨大突出、圆滑松软。雄鱼腹部较小，肥软。
2.体色：雌鱼胸部鳞片白嫩色，亦有的个体呈微黄色，腹部无黑斑，体色较淡。雄鱼胸腹部有较多的灰黑色、蓝黑色花纹，体色较深，充分成熟时体侧呈现出暗紫红色。
3.鳍条：雌鱼背鳍上斑点较大、模糊，排列不规则，呈半透明淡黄色；腹鳍淡黄白色、灰白色；尾鳍上有2条黑色斑纹。雄鱼背鳍上的圆点较多，自下而上排列整齐；腹鳍有黑色的条纹；尾鳍上有3条以上的黑斑纹。
4.生殖孔：雌鱼生殖孔大而突出，圆形、椭圆形，粉红色，充分成熟时鲜红色，生殖孔突出。雄鱼生殖孔狭小而微凹，呈三角形，充分成熟时呈微红色，红色圈较小。
检查时操作要谨慎，动作要轻，速度要快，防止损伤亲鱼和过强刺激亲鱼，防止流产。检查过的亲鱼按雌雄、按成熟度分池放养，继续加强投饲管理，冲水刺激，直到水温上升到20℃以上，开始催产前2～3天左右停食，准备催产。
