(四)催产亲鱼的选择
1.亲鱼捕捞和运送梭鱼善于跳跃和钻底,不易捕捞,因此在拉网时必须加盖网或将上纲拉离水面,下纲要踩紧,网移速度不宜太炔。为了防止亲鱼受伤,捕亲鱼的网衣可用柔软的棉线或维尼纶线制作,网目应在1.5cm以上。一个培育池的亲鱼,最好1—3次用完;多次捕捞易影响催产效果。起网时,下水人员不宜过多,一般可由2一3人捉鱼和选鱼。捉鱼时一手轻托胸部,一手托头部,顺水送人运送亲鱼的布夹内。运送亲鱼的布夹,要比鱼体宽长些。提送时,布夹后部要略为提高些,防止鱼从鱼夹后面滑落,布夹内最好带些水,运送时要轻、快,防止亲鱼受伤。
2.雌雄鉴别催产时要握掌雌雄比例伪搭配,故需要正确的鉴别亲鱼的雌雄。鲻、棱鱼的第二性征不明显,雌雄鉴别较困难,但性成熟的亲鱼,雌雄较易识别。梭鱼一般可根据如下特征:雌鱼头部两颊宽大,呈三角形,体长与体高之比较雄鱼为小,腹部膨大较圆,有一定弧度,生殖季节,生殖孔外翻,稍大,呈桃子形的红色乳突,一般个体较大;雄鱼头部两颊呈椭圆形,体长与体高之比较雌鱼为大,腹部轮廓细长,近于平直,泄殖孔较小,呈圆柱形的白色乳突,个体较小。
3.成熟亲鱼的选择正确选择成熟的亲鱼是保证催产成功的关键,特别是早期催产,更应严格选择。但目前尚无一种比较理想的方法,一般只是根据鱼体外形,结合培育情况和季节等经验来选择。外形观察:主要是从亲鱼腹部的大小、弹性和松软程度等来鉴别。雌鱼应选择腹部膨大,柔软而富弹性感,卵巢外观轮廓较明显,生殖孔红润略突出者,进行催产效果较好。若腹部看起来饱满而不松软,或腹部膨大只限于前部,生殖孔前方的后腹部扁平、较硬者,皆说明不够成熟,或成熟度较差,催产时间可适当延迟。雄鱼可选择经挤压后腹部近生殖孔处,有浓稠乳白色精液涌出为好。
挖卵观察:成熟的雌鱼除外表观察外,还可用特殊的取卵器挖卵来观察它的形状、大小和色泽,用此方法内外对照则更有把握。挖卵器为直径3.0一3,5mm,长约20cm,用竹、不锈钢、塑料等制造均可(如图2一4.挖卵器头部开一长约2cm的空槽,头部顶端钝圆形,挖卵部分表面要光滑,以免损伤卵巢。
使用时将挖卵器准确而缓慢地垂直插入生殖孔内,然后向左前方或右前方斜插,伸入一侧的卵巢约4cm左右,将挖卵器旋转几下后抽出,即可得到少量卵粒,将卵放在玻璃片上,进行肉眼和显微镜观察。如果棱鱼卵粒呈米黄色或桔黄色,饱满而有光泽,卵粒间粘连松弛,放入水中搅动能散开的,卵粒直径在0.72mm以上者,即可选作催产用亲鱼。鲻鱼的平均卵径则必须大于0,65mm,至少也应为0.60mm。这样对垂体激素才能产生敏感反应。催产才能有效。
4.雌雄搭配比例催产亲鱼的雌雄比例应适当搭配,现一般采用雌1雄1.5的搭配比例。如雄鱼的成熟度较差,可适当提高比数。用过的雄鱼伺养一段时间后,可以再用一次。
(五)催产剂的注射
1.注射剂量 能引起鱼类正常排卵、排精的每千克鱼体所用的催产激素的量称剂量。各种激素的剂量单位是不同的,如脑下垂体用mg或个/kg,绒毛膜促性腺激素用mg或国际单位/kg,释放激素类似物用ug/kg表示。
正确掌握催产剂的种类和用量,不仅能促使亲鱼顺利产卵和排精,而且能促使亲鱼性腺成熟度在短期内有明显进展的作用。目前我国对性腺达到*期的雌梭鱼,采用鲤、棱鱼垂体、人绒毛膜促性腺激素及促黄体生成素释放激素类似物,或几种激素混合注射,均能有效地促使卵巢排卵。其有效的剂量为:使用单一激素催产梭鱼:每千克雌鱼注射棱鱼脑下垂体17—30个(或15—20mg),或鲤鱼脑下垂体14个(或15—20mg):或鲫鱼脑下垂体11—40个;或HCG3500—8000国际单位;或1RH—A100—300ug。使用混合激素催产: LRH一A150ug+梭鱼或鲤鱼垂体10mg; LRH一A100u g+HCG5.5mg(效价1mg) +棱鱼或鲤鱼垂体5mg)或LRH一A400ug+HCG1000国际单位+ 鱼脑垂体1. 5mg。
对鲻鱼进行催产诱导排卵的有效剂量,据福建省水产研究所的试验,雌体每尾注射梭鲻垂体200个,约重250mg。我国台湾催产鲻鱼的经验表明:一般雌亲鱼在生殖季节时,成熟系数11一12,卵径0.6一0,7mm,每尾使用2.5一6个鲻鱼的脑垂体与10一60家兔单位的西那荷林(Synah0rin)的混合液,催产能获良好结果。并指出注射150一300mg的维生素E对产卵是重要的。美国夏威夷海洋研究所,曾用总剂量为49一78国际单位/g体重的绒毛膜促性腺激素注射诱导溯鱼在池中产卵,并指出鞋垂体促性腺激素(SG一Gi00),对鲻鱼是有效的催产剂,剂量为11.9一20.9ug体重(1mgSG一G100等于2250国际单位的HCG)。
催产的有效剂量随成鱼的成熟程度、环境条件和催产剂的质量等而变化,因此应根据具体情况灵活掌握。成熟较好的亲鱼剂量可适当低些,性腺发育较差的亲鱼,剂量可适当高些;在催产早期,水温较低,剂量可适当高些,并增加垂体的用量。在催产中期、水温较高,剂量可适当低些。
2.注射次数和时间注射次数分一次注射和分次注射两种,后者是把预定的药量,分工或三次注入鱼体。目前我国对梭鱼催产多采用二次注射,第一针剂量为总剂量的1/3一1/8,第二针再将剩余的药量全部注入鱼体。如用混合激素时,第一针可不加HCG,第二针一并注射。雄鱼如成熟度好,可在雌鱼注射第二针时进行一次注射,剂量为雌鱼的一半。如成熟度差,也可分二次注射,第一针的剂量和雌鱼的第一针一样,第二针为雌鱼的一半。两次注射租距时间,一般以24h为好,第一针注射大多在下午进行。美国夏威夷用激素(HCG)对鲻鱼进行催产,应用两次注射,第一次为预备计量,注射总剂量的1/3 (20国际单位/g体重),经24h后,再进行第二次较大剂量的注射(约40国际单位/g体重),雌鱼在第二次注射后24h内产卵。以色列“DOR”养殖研究站,用鲤鱼脑垂体采取三次注射,使原蓄养在淡水中的鲻鱼获产卵成功的良好效果。方法是将蓄养在淡水中雌鲻鱼捕出按1.6个垂体/kg体重剂量进行第一次注射,然后放入淡水蓄养槽(1.65mx1.25m的水泥槽)暂养,过7h后进行第二次注射,剂量为垂体2个/kg,再过7h后,进行第三次注射,剂量2个/kg,并加入2国际单位的黄体素。鲻鱼在淡水槽中经1—2天后,将其转至含有一半海水的水槽中,并在12—24h内逐渐将水全部换成海水,在此海水槽中经17h后便开始产卵。
从生理角度来看,在自然情况下,促性腺激素从脑垂体中分泌出来是一个逐渐的过程,分次注射更符合鱼类生理的客观规律,它有利于卵母细胞成熟的准备,以及成熟过程比较顺利的进行和完成。特别是对于成熟不够充分的亲鱼,采用多次注射可得到更好的效果,它可避免亲鱼的生理反应过急,因而引起卵子的成熟和排卵的失调。同时还可以在第一次注射后观察雌鱼卵巢有无反应,而判断它是否充分成熟。
3.注射液的配制激素脑垂体或LRH类似物,须用注射用水(生理盐水或冷开水)溶解或制成悬浊液后,方能使之随水注入鱼体。注射用水的量,一般每尾鱼用2ml注射液。垂体注射液的配制根据亲鱼的体重,计算所需要的垂体数量,将新鲜或保存的垂体放入干燥的研钵内,充分研磨,然后加入事先计算好的注射用水数滴,再研成糊状,最后,将注射用水余量加入,充分搅拌制成脑垂体悬浊液。
激素注射液的配制按需要量用消毒的注射器吸取需要的注射用水,将针头插入激素瓶的橡皮塞内,将水注入,充分溶解后,即可待用。注射液配好后,吸人注射器内,分别记录各注射器的号码和预定注射鱼的编号,以免注射时拿错,注射液应现配现用。
4.注射部位和方法注射部位有体腔注射和肌肉注射两种,二者效果相同,一般多用前者。体腔注射:注射时,把亲鱼放在布夹中,一人托鱼,将鱼侧仰,使注射部位略露于水面之上,另一人持注射器(针头不宜过大和过小。一般以6、7、8号针头为宜),在鱼体胸鳍或腹鳍的基部内侧无鳞处,将针头朝鱼体背鳍方向与鱼体表面约成45度角刺入体腔约1.5—2cm,徐徐注入药液。肌肉注射:在背鳍与体侧中线之间的背部肌肉处,用注射针头稍挑起一鳞片,并顺着鳞片刺人肌肉2cm左右,慢慢地注入药液,注射完后,用手指按住针头口片刻,以防药液外溢。
此外,尚有通过雌鱼泄殖孔直接注射人卵巢的。1972年中国科学院海洋研究所曾以此法成功地诱导棱鱼在池塘中自行产卵。注射前应将注射用具加以煮沸消毒,将注射器振荡,使注射液摇匀,防止沉淀,并排出空气。注射的动作要迅速,在注射时,当针已刺人而亲鱼突然猛烈挣扎,则应立即拔出针头,待平静后再进行注射,以免针头折断,损伤鱼体。
(六)催产后亲鱼的蓄养经过注射激素后的亲鱼可放人亲鱼蓄养箱内或直接放入产卵池中蓄养,蓄养箱可用聚乙烯网布制作,规格为3x2x2m左右。蓄养箱应安放在水质清新、氧气丰富、盐度适宜的鱼池中,用这样的网箱蓄养亲鱼,既便于检查,又不会伤害鱼体。上述规格的网箱每次可蓄养亲鱼8—10尾。雌雄鱼以分箱暂养为好,这样在检查雌鱼性成熟情况时,可不惊动雄鱼,操作方便。中国科学院海洋研究所曾将催产后亲鱼置于用苇箔在池边圈成的2m见方的蓄养栏中。台湾鲻鱼人工繁殖时,采用大小为5x7x1.5m的暂养池,并用尼龙网将池子一隔为二,作为亲鱼经激素处理后暂养用。并将新鲜的海水经过滤池注入池中,在每池中的流速约为50L/min。
亲鱼从注射催产剂(分次注射指最后一次注射)到发情排卵所经历时间为效应时间,它的长短与卵巢发育程度关系甚大。卵巢发育成熟基础较好者(Ⅳ),1天之内即可排卵。大多数(Ⅳ)约在第1次注射后两天左右排卵。差的也有2—3天的。对于成熟正常的亲鱼来说,排卵时间主要决定于水温的高低。一般在一定范围内水温高则排卵快,反之则慢。棱鱼经第二次注射后,在水温16—22℃之间,一般在24—45h之内即可排卵,最早的也有在20h后排卵者。
鲻鱼在水温22.5—24.6℃范围内,其排卵时间一般为10—24h。在生产实践中,常根据水温来预测亲鱼排卵、产卵的时间,从而合理的安排工作,保证人工授精适时进行。
(七)自行产卵卵巢成熟很好的亲鱼注射激素后,可按一定雌雄比例(雌:雄=1:2)放人产卵池,使其在池内自行产卵、受精。梭鱼的产卵池,必须预先严格清整,并施肥繁殖饵料生物。池水必须保持适宜的盐度。鲻鱼产卵要求盐度高,一般盐度在32‰左右较适宜(24.39—35.29‰)。梭鱼产卵池,盐度需在15‰以上,这样才能进行正常受精与孵化。当催产亲鱼放人产卵池后,必须注意产卵池的管理。要观察亲鱼动态,当鱼卵大量产出后,要及时捞出,除去杂草污物,计数,然后放人孵化器孵化。也可捞出亲鱼,让卵子在池中孵化。