日本囊对虾是我国海水养殖的重要品种之一,目前主要采取粗养和半精养,产量相对较低,而且养殖成功率较低,在华南广东、广西和海南三省养殖成功率低于10%。如何开发出日本囊对虾高产、安全和高效的养殖模式,成为调整对虾养殖品种结构,增加经-济效益,维持海水对虾养殖业健康可持续发展的一个关键问题。高位地膜养殖模式是华南地区对虾精养的主要模式,笔者1998年在海南琼山三江-首次采用地膜进行斑节对虾的养殖试验,并采用地膜改造老化虾池取得成功并大面积推广,高位地膜养殖模式用于南美白对虾养殖也取得成功,1999年以来一直进行地膜池养殖日本囊对虾实验,2008年在海南省昌江-南疆生物技术有限公司三联基地进行日本囊对虾高产养殖试验,取得成功。通过试验,建立一套日本囊对虾无特定病原-高产养殖技术。
一、实验地点和条件
1.试验地点:在海南省昌江-南疆生物技术有限公司三联基地选用4口地膜覆沙池(211#、212#、311#、312#),池塘面积均为0.313hm2,进行日本囊对虾无特定病原-养殖高产试验。
2.试验条件:池塘结构为改良的高位地膜池,基本结构与其他提水集约化养殖模式结构相似, 主要由5个部分组成, 即提水进水系统、虾池、中央排污排水系统、增氧系统和中间蓄水池处理水系统。提水进水系统包括海水的沙滤池、引水渠或管道、提水动力装置、 虾池进水渠、进水管等。排水系统为虾池中央排污排水共用, 经-排水管汇入总排水渠入海。增氧设备为每亩配备0.75kW水车式增氧机1台, 视池水溶解氧情况开启和关停。中间蓄水池处理水占池塘养殖面积的20%,两个池塘轮流使用。池塘底部采用地膜覆沙,沙层厚度为30-40 cm,防止渗漏和便于彻底清除病原-。养殖过程早期15 d内投喂卤虫无节幼体和天然鱼粉配合投喂,15 d以后采用全人工配合饲料投喂。
3.病原-检测:主要检测白斑综合症病毒(WSSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、桃拉综合症病毒(TSV)、黄头病毒(YHV)、感染性肌肉坏死病毒(IMNV)和坏死性肝胰腺炎细菌(NHPB)等6种病原-,采用台湾锐基国际股份有限公司提供的半定量IQ2000TMPCR试剂和方法。半定量IQ2000TMPCR检测法:
试剂配法:第1次扩增反应(First PCR):8μl/reaction, First PCR PreMix 7.5μl,IQzyme DNA Polymerase 2U/μl 0.5μl;第2次扩增反应(Nested PCR): 15μl, Nested PCR Polymerase2U/μl。
反应条件:第1次扩增反应(First PCR):94℃ 2 min;之后再跑94℃ 20 s;72℃ 30 s,重复15圈;末圈之后加跑72℃ 30 s,20℃ 30 s的条件。第2次扩增反应(Nested PCR):94℃ 20 s;62℃ 20 s;72℃ 30 s,重复30圈;末圈之后加跑72℃ 30 s,20℃成 30 s的条件。再将PCR产物于琼脂凝胶中进行电泳检测,经-荧光紫外成像断定结果后拍照保存结果。
二、试验结果
放苗时间为2008年7月20日,放苗密度112.5万尾/ hm2,收虾时间:2008年12月10日开始陆续收获,养殖时间为143-152 d,平均单产5645 kg/hm2,规格100-116尾/kg,产值565030元/hm2,利润为398030元/hm2,饵料系数1.75,成活率55%-60%,养殖成功率100%。养殖对虾没有携带白斑综合症病毒(WSSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、桃拉-综合症病毒(TSV)、黄头病毒(YHV)、感染性肌肉坏死病毒(IMNV)和坏死性肝胰腺炎细菌(NHPB)等6种病原-。
三、讨论
日本囊对虾养殖主要控制好以下5个关键点:
1.虾塘的彻底清理和消毒:采用高压水枪冲洗干净地膜上覆盖的沙层,翻耕、暴晒等,整个过程需要1个月左右,然后进水20-30cm,以盖住池底为限,采用有效氯浓度为50-100 g/m3的漂白粉或其他含氯消毒剂,彻底杀灭池底病原-生物和携带病原-的宿主生物,24 h后排干池水。然后进水培水。
2.虾苗携带病原-检测:虾苗检测方法和数量。采用半定量IQ2000TMPCR检测WSSV、TSV、IHHNV、YHV、IMNV和NHPB等,采样数量:150尾,分成30个/组,共检测5组,5组均成阴性,可以确认虾苗没有携带上述病原-,达到95%的信度。
3.养殖用水综合处理:养殖用水先经-过沙滤,然后采用有效氯浓度15-20 g/m3的次氯酸钠或漂粉精等含氯消毒剂处理养殖用水,余氯消失后采用105-106个/ml的光合细菌或芽孢杆菌进行处理,抑制有害菌的繁殖,72 h可以使用,但是在海水悬浮颗粒过多时需加大光合细菌或芽孢杆菌用量。消毒剂最好轮换使用,以免产生抗药性。
4.饲料的选择与使用:选用优质的饵料,严格控制投饵量,少量多次。放苗早期,一般放苗开始至10 d以内,最好采用虾片、卤虫或天然鱼粉等进行营养强化,使用卤虫等活饵料需要进行检测,采用半定量IQ2000TMPCR检测WSSV、TSV、IHHNV、YHV、IMNV和NHPB等携带情况,确认没有携带病原-方可使用。
5.日常管理
1)敌害生物的防除:主要防止蟹类、鸟类和老鼠传播病原-,蟹类一般大型蟹用蟹笼诱捕,小型蟹可用灌石灰于蟹洞中或向蟹洞中投入乙炔块,将蟹杀死。鸟类和老鼠的危害目前只能以防为主,特别是对一些涉禽类,可用加大池塘水位,增大池壁陡度,使这些鸟类无法涉水活动。对于一般吃鱼鸟,则可在池塘边缘插上一些树枝或象形物,吓跑鸟类。积极的办法是派专人看管。
2)中后期养殖用水的处理:配备约占养殖面积的10%-20%面积的蓄水沉淀池,养殖过程采用少量多次添加的的办法,可以添加μ-水或经-过中间蓄水沉淀池处理过的海水。
所有养殖进水包括第一次进水和以后的添换水均需采用处理水,一般采用以化学沉淀法结合生物方法的综合处理措施处理养殖用水,具体措施是先采用有效氯浓度15-20 g/m3的次氯酸钠或漂粉精等含氯消毒剂处理养殖用水,72 h后105-106/ml的光合细菌或芽孢杆菌,72 h可以使用,但是在海水悬浮颗粒过多时需加大用量。另外消毒剂最好轮换使用,以免产生抗药性。
3)定期抽检对虾和虾池中浮游生物,及时采取措施:采用半定量IQ2000TMPCR检测WSSV等病毒和细菌情况等,采样数量同虾苗:每池取150个样品,分成30个/组,共检测5组,达到95%的信度。