取灭菌脱脂牛乳(脱脂牛乳的处理：牛乳2000r/min离心10min脱脂，然后115℃灭菌20min，或间歇灭菌3次，经检查无菌后备用)1~2mL滴加在灭菌培养皿或试管内，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。
细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏。前两者可保藏2年左右，有些丝状真菌甚至可保藏14~17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便，不需要特殊设备。将滤纸剪成0.5cm31.2cm的小条，装入0.6cm38cm的安瓿管中，每管1~2张，塞以棉塞，121℃灭菌30min。将需要保存的菌种，在适宜的斜面培养基上培养，充分生长。
用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内，使其吸饱，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。将安瓿管放入内有P2O5作吸水剂的干燥器中，用真空泵抽气至干。将棉花塞入管内，用火熔封，保存于低温下。需要使用菌种，复活培养时，可将安瓿管口在火焰上烧热，滴一滴冷水在烧热的部位，使玻璃破裂，再用镊子敲掉口端的玻璃，待安瓿管开启后，取出滤纸，放入液体培养基内，置温箱中培养。
